제약회사 연구원의 블로그

— 우리는 보정을 하고 있는 걸까, 아니면 또 다른 편향을 만들고 있는 걸까처음 LC-MS 기반 metabolomics를 시작하면누구나 이렇게 배운다.“internal standard(IS)를 쓰면 정량이 정확해진다.”그래서 자연스럽게 생각한다.IS 넣었으니까 문제 없겠지normalization 했으니까 괜찮겠지하지만 실제 데이터를 다루다 보면이 믿음은 금방 흔들린다.internal standard를 넣었는데도결과가 이상하게 변하는 순간이 온다.batch마다 값이 달라지고특정 metabolite만 튀고biological interpretation이 맞지 않는다그때 비로소 깨닫게 된다.문제는 internal standard의 ‘존재’가 아니라‘선택’이었다는 것.1. internal standard는 만능이..

IS가 있는데도 결과가 무너지는 이유1. “IS는 문제없는데요?”라는 말이 가장 위험하다LC-MS/MS 분석에서결과가 흔들릴 때가장 먼저 확인하는 것은 거의 항상 이것이다.IS peak 있음RT 정상area도 큰 문제 없어 보임그리고 이렇게 결론이 내려진다.“IS는 정상입니다.”이 문장은안심을 주는 말처럼 들리지만,실제로는 가장 많은 문제를 숨긴다.2. IS가 있다는 사실과, IS가 ‘작동한다’는 것은 다르다우리는 종종IS를 이렇게 생각한다.넣어두면 자동으로 보정해주는 장치있으면 matrix effect도, loss도 해결됨하지만 IS는존재만으로는 아무것도 보정하지 않는다.IS가 보정 역할을 하려면아주 까다로운 조건이 충족되어야 한다.3. IS 보정이 성립하는 전제 조건IS가 제대로 작동하려면분석 시스템..

LC-MS/MS 정량 분석의 정확도와 재현성을 결정짓는 숨은 변수1. 서론 – 내부표준의 존재 이유: “정량의 기준점을 잡는 눈금”LC-MS/MS 기반 정량 분석에서 internal standard(IS)는 단순히 신호를 나누어주는 보정 인자가 아니다.IS는 시료 전처리, 이온화, 분리, 검출 전 과정에서 발생하는 변동을 상쇄하는 기준점(reference point)으로 작용한다.즉, internal standard의 품질과 특성은 분석법 전체의 reproducibility를 결정한다.동일한 시료라도 matrix가 다르고, 전처리 과정의 손실율이 다르면 raw peak area는 쉽게 흔들린다.이때 IS는 analyte와 동일한 물리·화학적 거동을 보이며 변동을 보정한다.💬 “IS는 분석자의 눈금이다...